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Pacific Blue SE

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B40927 5 mg ¥1580.00 100
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Pacific Blue SucciniMidyl Ester、Pacific Blue NHS ester、PB-NHS Ester PB succinimidyl ester、Ocean Blue, SE、太平洋蓝琥珀酰亚胺酯
效能等同Thermo Fisher Pacific Blue™琥珀酰亚胺酯
本文中Pacific Blue™为赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)的商标及注册商标

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实验操作小课堂

  • 问:SE染料如何标记IgM抗体呢?
  • 答:常规IgM标记采用中性pH缓冲液,用磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7.4)将IgM抗体溶解至浓度为2.5~5 mg/mL。需要注意的是:中性pH条件下,水解反应优于标记反应,因此IgM标记需使用更高的染料比例(摩尔比约为50∶1或100∶1);
    在搅拌或涡旋蛋白质溶液的同时,向每毫升抗体溶液中逐滴加入70~140 μL 10 mM染料储备液,对应的染料与IgM摩尔比为50∶1至100∶1;若需更多染料以达到最佳标记度(DOL),可将储备液浓度提高至20 mM。
  • 问:蛋白未被标记可能的原因是什么?
  • 答:可能有以下两点原因:
    a.可能是偶联缓冲液含伯胺类物质(如Tris、甘氨酸),干扰反应;应该使用不含伯胺的偶联缓冲液(如硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或PBS)。
    b.可能NHS酯发生水解,失去反应活性;标记试剂临用前现配,禁止将NHS酯试剂存放于水溶。
  • 问:Pacific Blue SE、Alexa Fluor™ 405 SE、AMCA SE有什么区别?如何选择?
  • 答:用于蛋白或抗体标记,核心差异在激发光源、光谱、分子位阻:

    区别

    Pacific Blue SE

    Alexa Fluor™ 405 SE

    AMCA SE

    Ex/Em

    410/455 nm

    402/421 nm

    348/435 nm

    光谱窗口

    405 nm激发,蓝色

    405 nm激发,紫蓝色

    紫外激发,不适用405 nm激光

    位阻

    小分子香豆素,分子量小;标记后对抗体/蛋白抗原结合干扰更小

    分子量更大,空间位阻略大

    小分子氨基香豆素,分子量小,位阻低;但受限于紫外光路。

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Pacific Blue SE
Pacific Blue 琥珀酰亚胺酯

光谱串色低、光稳定性佳,高效共价标记含伯氨基生物大分子

  • 储运条件 -20 ℃避光保存,冰袋运输
  • 产品简介 Pacific Blue SE为胺反应型琥珀酰亚胺酯标记试剂,用于自主制备蓝色荧光生物偶联物,核心组分为PacificBlue SE活性染料,配套标记缓冲液与淬灭组分。其SE琥珀酰亚胺酯基团可与蛋白、抗体及细胞表面伯胺共价结合,生成稳定酰胺键,激发/发射波长404/455nm,适配405nm紫激光通道。针对传统香豆素染料pH敏感、易影响抗体活性、光谱串扰高的问题,本品pKa低,生理环境下荧光稳定、空间位阻小,易于搭建多色检测方案。可应用于流式多色免疫分型、免疫荧光成像、蛋白示踪、细胞表型分析及药物筛选评估,支持自制标记抗体、节约实验成本,为免疫分群、靶蛋白定位、肿瘤与炎症机制研究提供稳定标记方案,保证数据可重复,助力靶点验证与转化研究。
  • 应用范围 可用于抗体、多肽、氨基修饰寡核苷酸荧光标记
  • 产品特点

    生理环境荧光稳定:染料pKa≈3.7,在生理pH范围内无明显pH依赖型荧光淬灭,信号稳定;

    低光谱重叠:蓝色荧光发射波段与FITC、PE、APC等常用荧光探针交叉少,多色实验补偿压力低;

    高效共价标记:琥珀酰亚胺酯(SE)活性基团,温和碱性条件下特异性结合蛋白、多肽、氨基修饰寡核苷酸伯氨基,形成稳定酰胺键;

    良好光稳定性:相比AMCA等传统香豆素类染料抗光漂白能力更强,成像与长时间流式检测信噪比更佳。

  • 产品参数

    Ex/Em:416/451 nm

    溶解性:DMSO、DMF

    分子式:C14H7F2NO7

    分子量:339.20

    CAS号:215868-33-0

    Extinction coefficient(ε):46000

    Correction Factor CF280:0.2

    分子结构图: 


    光谱图:

     


  • 产品组分

    组分

    规格

    A. Pacific Blue SE

    5 mg

  • 问:SE染料如何标记IgM抗体呢?
  • 答:常规IgM标记采用中性pH缓冲液,用磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7.4)将IgM抗体溶解至浓度为2.5~5 mg/mL。需要注意的是:中性pH条件下,水解反应优于标记反应,因此IgM标记需使用更高的染料比例(摩尔比约为50∶1或100∶1);
    在搅拌或涡旋蛋白质溶液的同时,向每毫升抗体溶液中逐滴加入70~140 μL 10 mM染料储备液,对应的染料与IgM摩尔比为50∶1至100∶1;若需更多染料以达到最佳标记度(DOL),可将储备液浓度提高至20 mM。
  • 问:蛋白未被标记可能的原因是什么?
  • 答:可能有以下两点原因:
    a.可能是偶联缓冲液含伯胺类物质(如Tris、甘氨酸),干扰反应;应该使用不含伯胺的偶联缓冲液(如硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或PBS)。
    b.可能NHS酯发生水解,失去反应活性;标记试剂临用前现配,禁止将NHS酯试剂存放于水溶。
  • 问:Pacific Blue SE、Alexa Fluor™ 405 SE、AMCA SE有什么区别?如何选择?
  • 答:用于蛋白或抗体标记,核心差异在激发光源、光谱、分子位阻:

    区别

    Pacific Blue SE

    Alexa Fluor™ 405 SE

    AMCA SE

    Ex/Em

    410/455 nm

    402/421 nm

    348/435 nm

    光谱窗口

    405 nm激发,蓝色

    405 nm激发,紫蓝色

    紫外激发,不适用405 nm激光

    位阻

    小分子香豆素,分子量小;标记后对抗体/蛋白抗原结合干扰更小

    分子量更大,空间位阻略大

    小分子氨基香豆素,分子量小,位阻低;但受限于紫外光路。

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    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
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    体积   分子量 *
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    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
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    浓度 (final) × 体积 (final)
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