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5-CFDA, AM

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C20802 5 mg ¥1299.00 100
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效能等同Thermo Fisher 5-CFDA，AM（5-羧基荧光素二乙酸，乙酰氧基甲基酯）

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实验操作小课堂

  • 问：染色前为什么用PBS洗涤细胞2~3次？
  • 答：细胞培养液中的血清含有大量非特异性酯酶，若血清残留，会提前水解胞外的5-CFDA, AM探针，生成游离荧光产物，大幅升高背景荧光，干扰细胞真实荧光信号；充分PBS清洗可去除血清，显著降低非特异性染色，提升信噪比。
  • 问：和传统FDA染料相比，本品有什么优势？
  • 答：传统FDA水解产物无法稳定校验细胞膜完整性，仅能单维度参考酯酶活性；5-CFDA, AM水解产物额外携带羧基，负电荷更高，胞内锁存效果更强，可同步验证酯酶激活荧光与细胞膜完整度双重指标，大幅减少假阳性、不漏检早期代谢损伤细胞。
  • 问：本系列产品5-CFDA、5-CFDA-AM、5-CFDA-SE，有什么区别？
  • 答：本系列产品区别优势如下表。

    产品名称

    5-CFDA

    5-CFDA-AM

    5-CFDA-SE

    结构差别

    游离羧基

    AM脂溶性修饰

    NHS氨基反应活性酯

    细胞膜穿膜能力

    弱

    极强（三者最优）

    中等

    染料渗漏速度

    快

    中等

    几乎无渗漏

    细胞分裂追踪能力

    不支持

    不支持

    支持（长期追踪）

    固定后荧光保留

    完全淬灭（不可固定）

    完全淬灭（不可固定）

    稳定保留（可固定、可存档）

    细胞毒性

    极低

    极低

    低-中等（高浓度有毒性）

    核心适用场景

    短时活率检测、胞内pH测定、低成本快速观测

    高通量活力筛选、短时动态成像、微生物活菌计数


    细胞增殖、长期/体内示踪、固定共染、样本存档


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5-CFDA, AM
5-羧基荧光素二乙酸乙酰氧甲基酯（5-CFDA, AM ）

最快15 min标记，低渗漏低毒，信号稳定，检测细胞活力

  • 储运条件 -20 ℃避光保存，冰袋运输
  • 产品简介 5-CFDA, AM为脂溶性透膜型酯酶荧光底物，适用于活细胞活性同步检测。探针本身无荧光，可自由穿透完整细胞膜，进入活细胞后经胞内酯酶水解脱去AM封闭基团，生成带负电的5-羧基荧光素滞留胞内，激发产生绿色荧光，同步表征胞内酯酶活性与细胞膜完整性。对比FDA、钙黄绿素AM等染料，本品透膜效率更高、工作浓度更低，细胞毒性更小；水解产物胞内滞留能力更强，有效减少荧光外泄与背景干扰，荧光光谱适配488 nm激光器与FITC滤片，兼容荧光显微镜、流式细胞仪，依靠单探针双重检测机制精准判定活细胞状态。可用于细胞毒性检测、细胞增殖评估、活细胞示踪及共聚焦成像，支持与PI、DAPI共染区分活死细胞，广泛应用于肿瘤药理、干细胞、免疫研究与生物材料安全性评价，是细胞活性定性定量分析的标准化探针，提升实验数据稳定性，为细胞生理病理机制、体外药物筛选提供可靠可视化检测方案。
  • 应用范围 活细胞活性定性检测、活细胞活性定量检测、活细胞荧光标记与示踪、活死细胞双染分型、存活分析等
  • 产品特点

    双重验证检测机制：单染料同步检测激活荧光依赖的酯酶活性、留存荧光产物所需的细胞膜完整性，双维度协同判定；

    胞内锁存低渗漏优势：水解产物携带额外负电荷，胞内滞留效果显著优于传统FDA，大幅减少荧光外泄、背景升高问题，信号稳定、信噪表现优异；

    低毒高效透膜性能：脂溶性结构透膜效率更高，低工作浓度即可完成细胞负载，有效降低高浓度染料引发的细胞毒性；

    全平台光谱兼容：荧光光谱匹配488 nm激光器与FITC标准滤片，适配荧光显微镜、共聚焦、流式细胞仪全主流检测平台；

    多场景广泛适配：可用于细胞毒性检测、增殖评估、活细胞成像、流式分群等实验，能与PI、DAPI等染料共染。

  • 产品参数

    Ex/Em：485/515 nm

    分子式：C28H20O11

    分子量：532.45

    CAS号：124412-00-6

  • 产品组分

    货号

    组分

    18700 T

    C20802

    5-CFDA, AM

    5 mg

    注：使用次数为每次使用5 μM染色工作液，每孔加入100 μL，进行96孔板荧光显微镜检测计算。
  • 结果判读

    图1.5-CFDA, AM荧光成像图

    结果判读：本次实验视野内5-CFDA, AM孵育悬浮K562细胞呈清晰圆形，完整活细胞胞内充满均匀明亮绿色荧光，细胞轮廓边界分明，背景无明显游离荧光杂质；无荧光暗斑死细胞占比极低，细胞分布均匀、形态完整，无破碎细胞碎片干扰。

  • 问：染色前为什么用PBS洗涤细胞2~3次？
  • 答：细胞培养液中的血清含有大量非特异性酯酶，若血清残留，会提前水解胞外的5-CFDA, AM探针，生成游离荧光产物，大幅升高背景荧光，干扰细胞真实荧光信号；充分PBS清洗可去除血清，显著降低非特异性染色，提升信噪比。
  • 问：和传统FDA染料相比，本品有什么优势？
  • 答：传统FDA水解产物无法稳定校验细胞膜完整性，仅能单维度参考酯酶活性；5-CFDA, AM水解产物额外携带羧基，负电荷更高，胞内锁存效果更强，可同步验证酯酶激活荧光与细胞膜完整度双重指标，大幅减少假阳性、不漏检早期代谢损伤细胞。
  • 问：本系列产品5-CFDA、5-CFDA-AM、5-CFDA-SE，有什么区别？
  • 答：本系列产品区别优势如下表。

    产品名称

    5-CFDA

    5-CFDA-AM

    5-CFDA-SE

    结构差别

    游离羧基

    AM脂溶性修饰

    NHS氨基反应活性酯

    细胞膜穿膜能力

    弱

    极强（三者最优）

    中等

    染料渗漏速度

    快

    中等

    几乎无渗漏

    细胞分裂追踪能力

    不支持

    不支持

    支持（长期追踪）

    固定后荧光保留

    完全淬灭（不可固定）

    完全淬灭（不可固定）

    稳定保留（可固定、可存档）

    细胞毒性

    极低

    极低

    低-中等（高浓度有毒性）

    核心适用场景

    短时活率检测、胞内pH测定、低成本快速观测

    高通量活力筛选、短时动态成像、微生物活菌计数


    细胞增殖、长期/体内示踪、固定共染、样本存档


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    质量   浓度   体积   分子量 *
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